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　　　已有工具存在明显局限

　　　例如上海科技大学研究员马涵慧开发了DNA成像系统CRISPRainbow和CRISPR-Sirius，用于在活细胞中观察基因组的三维结构，并示踪它们的动态变化。前者创造性地在向导RNA骨架结构中引入了RNA适配体，用于标记DNA序列，并通过改变RNA适配体的类别，实现了不同DNA靶点的多色成像。后者则在此基础上进一步做了优化，通过增加RNA适配体的数目来提高成像质量。北京大学教授陈匡时团队开发的两种DNA成像系统，则通过引入分子信标和荧光共振能量转移成像方法来提高DNA成像信噪比，以提升成像清晰度。

活细胞DNA成像是指利用成像手段，对活细胞内的DNA序列进行标记和观察。活细胞DNA成像常用于检测基因组DNA在细胞核内的定位分布和动态变化等特征，帮助人们了解这些特征与基因表达调控之间的关系，加深人们在基因组层面对细胞生命粗暴㓜交videos乱叫小说活动的认识。在医疗领域，活细胞DNA成像可以用来检测细胞内基因组DNA的拷贝数，有助于21-三体综合征等染色体异常相关疾病的诊断。

　　　总而言之，在基于CRISPR/dCas9-EGFP的活细胞DNA成像工具中，利用一条向导RNA标记DNA往往信号太弱或容易脱靶，要实现特异性非重复DNA序列成像或多色成像，需要表达多条向导RNA，通过多个靶点DNA信号的富集作用，才能实现对目的非重复序列成像。而如果让每个表达元件只表达一条向导RNA，就会增加向导RNA表达元件的数量，提高成像的复杂度，降低成像效率。“如何高效率、高质量实现非重复DNA序列成像，一直是活细胞DNA成像领域的一大挑战。”杨良中说。

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【编辑:钱汉祥】