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　　　新型系统更加简便高效

　　　“我们开发的新型DNA成像系统CRISPRdelight正是利用了这一特点，通过表达一条能编码多条向导RNA的转录本（即CRISPR阵列）来进行成像，而非单独转录每条向导RNA。”杨良中介绍，这样既实现了对靶点DNA信号的富集放大，又避免了系统复杂度增加。而且这一条转录本不仅可以编码靶向同一DNA位点的向导RNA，也可以同时编码靶向不同位点的向导RNA，实现多位点多色成像。因此，新系统更加简便高效，容易通过增加向导RNA的数目提高成像质量，大大降低了活细胞中非重复序列DNA成像的门槛。

　　　“目前较为成熟的系统已经实现了活细胞内绝大部分重复DNA序列成像和多色成像，甚至在一定程度上实现了非重复DNA序列成像，但它们都存在明显的局限性。”杨良中举例说，比如一些系统，通过改进向导RNA表达质粒的构建方式，将多条向导RNA表达元件放到同一个质粒上，从而减少需要向细胞内递送质粒的数目，增强成像效果。但将多个表达元件构建到一个质粒的方法步骤繁多、操作复杂，并不利于推广使用。还有一些系统，通过将DNA的标记信号放大，实现一条向导RNA对目的序列的标记和成像。但仅利用一条向导RNA可能会存在标记脱靶的问题。

　　　由于新系统具有简便易操作等特点，杨良中认为，该系统未来有望应用于需要进行活细胞DNA成像的实验室，为活细胞中基因组DNA转录活性、DNA在细胞核内的定位分布和动态变化特征之间的关联性，以及等位基因之间表达调控的异质性等研究提供助力，还能进一步帮助研究人员了解三维基因组在细胞核内高度组织化的分子机制及其功能意义等。

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【编辑:孙念祖】