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   “当前,活细胞DNA成像工具的种类已经十分丰富。”论文第一作者、中国科学院分子细胞科学卓越创新中心博士杨良中介绍,其中大部分工具都是从CRISPR/dCas9-EGFP(EGPF是一种荧光蛋白质)系统衍生而来。这些已有的活细胞DNA成像工具分别从向导RNA的骨架结构和表达质粒构建方式等方面,对原始系统进行优化升级。

   由于新系统具有简便易操作等特点,杨良中认为,该系统未来有望应用于需要进行活细胞DNA成像的实验室,为活细胞中基因组DNA转录活性、DNA在细胞核内的定位分布和动态变化特征之间的关联性,以及等位基因之间表达调控的异质性等研究提供助力,还能进一步帮助研究人员了解三维基因组在细胞核内高度组织化的分子机制及其功能意义等。

   与此同时,团队利用新系统揭示了基因位点在细胞核内的定位与其运动能力和转录活性的相关性,还实现了对4种活细胞内卫星DNA的多位点多色成像。

   非重复DNA序列成像和多位点多色成像是活细胞DNA成像长期面临的两大难题。如今,新系统的出现基本解决了非重复DNA序列成像的问题,但在活细胞DNA多位点多色成像方面,新系统仍有改进空间。“尽管我们通过在新系统中引入RNA适配体实现了多个重复DNA序列的多位点多色成像,但是RNA适配体的引入在一定程度上影响了系统对CRISPR阵列的加工能力。”杨良中说,要实现多个非重复DNA序列的标记追踪,未来还需进一步对CRISPRdelight进行优化。

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【编辑:朱希】

发布于:峨边彝族自治县
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