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　　　“当前，活细胞DNA成像工具的种类已经十分丰富。”论文第一作者、中国科学院分子细胞科学卓越创新中心博士杨良中介绍，其中大部分工具都是从CRISPR/dCas9-EGFP（EGPF是一种荧光蛋白质）系统衍生而来。这些已有的活细胞DNA成像工具分别从向导RNA的骨架结构和表达质粒构建方式等方面，对原始系统进行优化升级。

　　　新型系统更加简便高效

　　　“我们开发的新型DNA成像系统CRISPRdelight正是利用了这一特点，通过表达一条能编码多条向导RNA的转录本（即CRISPR阵列）来进行成像，而非单独转录每条向导RNA。”杨良中介绍，这样既实现了对靶点DNA信号的富集放大，又避免了系统复杂度增加。而且这一条转录本不仅可以编码靶向同一DNA位点的向导RNA，也可以同时编码靶向不同位点的向导RNA，实现多位点多色成像。因此，新系统更加简便高效，容易通过增加向导RNA的数目提高成像质量，大大降低了活细胞中非重复序列DNA成像的门槛。

　　　非重复DNA序列成像和多位点多色成像是活细胞DNA成像长期面临的两大难题。如今，新系统的出现基本解决了非重复DNA序列成像的问题，但在活细胞DNA多位点多色成像方面，新系统仍有改进空间。“尽管我们通过在新系统中引入RNA适配体实现了多个重复DNA序列的多位点多色成像，但是RNA适配体的引入在一定程度上影响了系统对CRISPR阵列的加工能力。”杨良中说，要实现多个非重复DNA序列的标记追踪，未来还需进一步对CRISPRdelight进行优化。

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【编辑:赵大华】