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   “我们开发的新型DNA成像系统CRISPRdelight正是利用了这一特点,通过表达一条能编码多条向导RNA的转录本(即CRISPR阵列)来进行成像,而非单独转录每条向导RNA。”杨良中介绍,这样既实现了对靶点DNA信号的富集放大,又避免了系统复杂度增加。而且这一条转录本不仅可以编码靶向同一DNA位点的向导RNA,也可以同时编码靶向不同位点的向导RNA,实现多位点多色成像。因此,新系统更加简便高效,容易通过增加向导RNA的数目提高成像质量,大大降低了活细胞中非重复序列DNA成像的门槛。

   非重复DNA序列成像和多位点多色成像是活细胞DNA成像长期面临的两大难题。如今,新系统的出现基本解决了非重复DNA序列成像的问题,但在活细胞DNA多位点多色成像方面,新系统仍有改进空间。“尽管我们通过在新系统中引入RNA适配体实现了多个重复DNA序列的多位点多色成像,但是RNA适配体的引入在一定程度上影响了系统对CRISPR阵列的加工能力。”杨良中说,要实现多个非重复DNA序列的标记追踪,未来还需进一步对CRISPRdelight进行优化。

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【编辑:黄强辉】

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